为研究在低温条件下好氧颗粒污泥(AGS)的形成及其脱氮性能,在序批式反应器(SBR)中 15℃条件下 60d 内培养出了成熟的具有良好短程硝化功能的 AGS,稳定运行阶段亚硝酸盐氮积累率(NAR)可以达到 90%以上,扫描电镜显示 AGS 主要由短杆菌和球菌构成. 通过批次实验研究了温度在 15℃时,粒径为 R1(1.0~2.0mm)、R2 (2.0~3.0mm)和 R3 (>3.0mm)的短程硝化 AGS 的脱氮特性. 其中 R1 亚硝酸盐氮积累效果最差,R2、R3 相差不大,其 NAR均可达到 90%左右,效果较好.AGS 粒径的增大会对基质的传质产生影响,这为氨化细菌(AOB)、硝化细菌(NOB)和反硝化细菌的生长提供了适宜的场所,有利于短程硝化的实现.通过微电极测定,在温度为 15℃、水中溶解氧(DO)浓度为 6~7mg/L 时,AGS 中氧气的传质深度为 600~700µm.好氧颗粒污泥(AGS)是生物自絮凝而形成的特殊生物结构,其技术起源于 20 世纪 90 年代[1].AGS技术与传统活性污泥技术相比具有很大优势,如颗粒污泥自身良好的沉降性、较高的生物量,以及较低的操作运行费用等。目前短程硝化反硝化成为废艺相比,具有需氧量小、碱度消耗少、反应时间短、反硝化所需碳源少、污泥产率低等优点,被认为是一种可持续的污水脱氮新技术。
AGS 内部氧传质限制使 NOB 生长受到抑制,进而使得亚硝化容易实现,而且良好的微生物固定化效果和颗粒污泥反应器较短的沉淀时间可以有效富集 AOB、淘洗 NOB.因此,短程硝化颗粒污泥的出现为高效低耗处理废水提供了新的选择。
温度对所有环境中微生物代谢和群落结构有很大的影响,其改变会导致生物转化过程改变.因此,通过研究温度改变对细菌产生的影响,从而理解它对自然环境和改造生态系统的作用是有必要的.在我国冬季,大部分污水处理厂污水温度只有 10℃左右,这样低的环境温度可以抑制微生物的新陈代谢和活动.生物脱氮工艺的处理效果与温度呈极强的负相关,当温度达到 10℃甚至更低时,适应常温(25℃左右)的污泥活性就会被大幅度抑制,而且低温会给污水的生物处理带来很多的问题,例如丝状菌的大量生长、污泥沉降性变差等.
在 AGS 系统中,低温会导致 AGS 的破坏、生物量流失等一系列问题,因此在低温条件下,AGS 系统很难启动.尽管这样,郭安等采用厌氧、好氧交替运行的小试 SBR 反应器,在秋、冬季温度由 18℃逐渐降至 10℃并长期维持在较低温度的下,培养出了具有良好物化特性的颗粒污泥,对生活污水中污染物的去除具有良好效果.王硕等采用内循环序批气提式反应器(SBAR)40d 在低温条件下培养出AGS,其对生化需氧量(COD)、氨氮(NH4+-N)和磷(P)的去除率分别为 87.2%、81.8%和 58.9%.粒径对颗粒污泥系统的效果具有重要影响.李定昌等研究了不同粒径成熟 AGS 中胞外聚合物的分布及物理化学特性.然而,关于粒径对 AGS 脱氮性能的影响少有研究.因此,本研究拟考察短程硝化 AGS 系统在低温条件下的启动过程及其稳定运行的情况,并筛选 3种粒径的 AGS,研究粒径对其脱氮性能的影响.
1 材料与方法
1.1 实验装置
实验所用装置为序批式反应器,如图 1 所示,反应器由有机玻璃板制成,高 170cm,直径为 8cm,反应器总容积为 8.5L,有效容积 8L,设定排水比为 50%.采用曝气泵(50L/min,50Hz)在反应器底部进行曝气;反应器外部设有水浴装置,用控温槽(上海朗晟,中国)控制反应器内水温恒定在 15℃.
1.2 接种污泥与实验用水
接种污泥取自北京市高碑店污水处理厂曝气池活性污泥,黑褐色.接种污泥的质量浓度(MLSS)为4600mg/L 左右,污泥的沉降指数(SVI)为 68.33,
MLVSS/MLSS=0.72.
实验用水为人工配制,模拟城镇生活污水,NH4+-N(以 NH4Cl 配制)质量浓度为 60mg/L,COD(CH3COONa) 值 为 300mg/L 左 右 ,P(KH2PO4) 为4mg/L,Ca(无水 CaCl2)为 40mg/L,Mg(MgSO4⋅2H2O)为 20mg/L.根据反应器实际降解 NH4+-N 的量,投加NaHCO3,维持反应器 pH 在 7.8~8.2 之间.每 1L 配水中添加 0.5mL 微生物生理活动所必需的微量元素,其中微量元素成分为 FeCl3⋅6H2O 1500mg/L、H3BO3150mg/L、CuSO4⋅5H2O 50mg/L、KI 150mg/L、MnCl2⋅4H2O 110mg/L 、 CoCl2⋅6H2O 150mg/L 、Na2MoO4⋅2H2O 60mg/L、ZnSO4⋅7H2O 120mg/L.
1.3 实验方法
1.3.1 低温培养 AGS
反应器运行方式为序批式进水,每个周期 12h,分为进水(3min)、曝气(9.5h)、沉淀(1-5min)、排水(1min)和静置(剩余时间)5 个阶段.
AGS 启动培养阶段(阶段 1,1~60d)、稳定运行阶段(阶段 2,61~100d)和亚硝化破坏与恢复阶段(阶段3,101~140d),其中在 1~99d 控制 DO 在 6mg/L 左右,100~109d 提高 DO 至 8mg/L 左右,110~140d 降低DO 至 5mg/L 左右.
1.3.2 批次实验装置和程序批次试验
使用500mL 集气瓶,进行不同粒径 AGS 的脱氮特性测定.反应器运行第 138d,亚硝化效果稳定后进行批次实验, AGS 从反应器中取出,先用自来水冲洗 3 遍以去除表面的残留基质,再用孔径为 1.0,2.0,3.0mm 的不锈钢筛网过滤得到粒径为 R1(1.0~2.0mm)、R2(2.0~3.0mm)和R3(>3.0mm)的AGS. AGS外观形态如图2所示,刻度尺最小刻度为 1mm. 用分析天平分别称取相同质量的 3 种粒径湿污泥,将污泥和模拟配水(与反应器进水水质相同)一起放入有效容积为500mL 的集气瓶中,集气瓶中 MLSS 与反应器中相同. 保证其他实验条件相同,每隔 1h 取样测定NH4+-N、亚硝酸盐氮(NO2--N)、硝酸盐氮(NO3--N)和COD浓度,以此来确定不同粒径AGS的亚硝化活性,每次取水样体积为 5mL.
1.4 分析项目与方法
NH4+-N、NO2--N 和 NO3--N 的测定分别采用纳氏试剂分光光度法、N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法和麝香草酚分光光度法;DO、T 和 pH 值通过在线测定仪(WTW,德国)进行测定;MLSS和MLVSS均采用重量法;COD 采用 COD 快速测定仪(连华,中国)进行测定;采用 Olympus BX51/52 (OLYMPUS,日本)光学显微镜观察 AGS 的外形;AGS 表面微观形态采用 Hitachi S3400N (HITACHI,日本)扫描电子显微镜(Scanning electronic microscopy,SEM)表征;AGS 粒径测量采用湿筛分法:从反应器中取出污泥样品,使其通过不同孔径的标准筛,将截留在不同孔径筛网上的颗粒污泥进行收集;AGS 中 DO 通过微电极测定,实验所用的微电极设备主要由下列几部分组成:Unisense 公司生产的 Microsensor MultimeterVersion 2.01 四通道主机、Z 轴微米级马达推进器、OX-10 氧微电极.
2 结果与讨论
2.1 污泥特性的变化
在反应器开始启动阶段,接种2L活性污泥,接种后反应器内 MLSS 为 4630mg/L 左右,培养过程中污泥颜色逐步从黑褐色变为淡黄色,最后变为黄褐色,如图 2 所示.
反应器在低温条件下启动过程中出现了丝状菌大量繁殖的现象,这与 Kreuk 等和 Bao等的实验结果一致.本实验通过将沉降时间从5min降低到3min,逐渐将絮体污泥筛选出去.在整个运行阶段污泥物理性质的变化如表 1 所示.
第 10d 在反应器中可以看到灰褐色形状不规则的细小颗粒,此阶段略长于常温条件下 AGS 的培养过程.第 15d,SVI 从 68 升高到 104,反应器中的污泥沉降性能由于丝状菌的大量增殖变差,大量沉降性不好的污泥随排水排出反应器,MLSS 从 4630 降低到 1824mg/L.第 30d,SVI 从 104 降低到 84,MLSS 从1824 升高到 2139mg/L,颗粒平均粒径在 1.3mm 左右.
之后污泥的沉降性越来越好,污泥量逐渐升高,第60d,SVI 值达到 36,MLSS 为 4356mg/L,结构密实、表面光滑的颗粒污泥占据反应器的主体.形成的AGS 粒径逐渐变大,在第 60d 平均粒径为 3.2mm.由表 1 可知,培养过程中 MLVSS/MLSS 的值先增大后减小,这是因为接种污泥取自污水厂,污泥中还有大量 的 无 机 质和其他惰 杂质 , 使得接种污泥MLVSS/MLSS 的值较低,随着培养的过程,无机质等逐渐被筛选出去,并且微生物的增殖使得 MLVSS/MLSS 的值逐渐升高,45d 后,MLVSS/MLSS 的值降低,分析其原因可能是随着颗粒污泥粒径的增大,颗粒污泥内部无机物质的富集以及表面对无机质的吸附作用增强的共同作用.
第 10、30 和 60d 的 AGS 外形如图 2a、b、c所示,d 为 100d 时 AGS 扫描电镜图像,可以看到颗粒污泥主要由短杆菌和球菌构成,丝状菌很少,颗粒污泥结构紧密,具有孔隙结构.
2.2 AGS 脱氮性能
由图3可知,开始运行的几天,出水NH4+-N浓度很低,出水 NO3--N 的浓度超过 50mg/L,而 NO2--N浓度仅为1mg/L左右,进水NH4+-N几乎全部转化为NO3--N,接种污泥具有很高的硝化性能,而且反应器中 DO 很高,因此未出现 NO2--N 积累的现象.随后由于大量沉降性能不好的污泥随排水排出,反应器内生物量大幅度降低,导致反应器出水NH4+-N浓度逐渐升高.15~30d,随着反应器中 MLSS 的提高,出水NH4+-N 浓度逐渐降低,最终去除率接近 100%.第32d,随着颗粒污泥的形成,反应器中出现 NO2--N 积累,而且NAR 随着AGS的粒径增大逐渐升高,在57d时达到最高并持续稳定了 43d,此阶段 NAR 始终在90%以上,出水 NO3--N 浓度维持在 5mg/L 左右.第100d,保持其他条件不变,提高曝气量,使反应器中的DO 达到 8mg/L,短程硝化被破坏,9d 时间出水NO3--N 浓度急剧升高,NAR 由 91.93%降至 2.07%.随后,调节 DO 在 5mg/L 左右,16d 后 NAR 逐渐升高达到 90.07%,短程硝化得到恢复并稳定运行了 16d.
如上所述,与常温条件下相比,系统的短程硝化性能具有良好性能,但其 NH4+-N 去除效率会有所降低.
2.3 粒径对 AGS 性能的影响
2.3.1 去除有机物的性能
由图 4 可以看出,3 种粒径的 AGS 对 COD 的去除效率均可以达到 80%以上,整体差别不大,出水COD 可达到一级A标准,对COD的去除均有较好的效果.在周期的前 2h,可以看到粒径越大,COD 的去除速率越低. R1 中颗粒粒径较小,比表面积较大,因此前期对 COD 的吸附作用较强,同时 R2 和 R3 中因为基质传质的作用的存在而使得粒径较大的颗粒内部微生物消耗基质的速度变慢,所以对 COD 的去除 R1 要略快于 R2 和 R3[13].
2.3.2 短程硝化性能
由图 5 可见,随着粒径的增大,系统中产生的 NO3--N 越少,NO2--N 积累的效果越稳定,粒径>3.0mm 的小试中整个过程几乎没有 NO3--N的产生.但是随着粒径的增大,系统 NH4+-N 的去除率降低,R1 最终出水的 NAR 没有 R2 和 R3 高,是因为颗粒粒径较小,即使颗粒内有氧气的传质作用,但内部的DO 浓度还是比较高,NOB 的生长没有得到有效的抑制,生成了大量的 NO3--N,因此 NAR 比较低.而R2 和 R3 的 NAR 仅仅相差 10%左右,可以看出,当水中 DO 为 6~7mg/L 时,粒径为 2mm 的颗粒污泥已经可以提供实现短程硝化适宜的微环境.
由图 2 可知,在混合粒径的反应器中,亚硝化稳定运行阶段,基本没有 NO3--N 的产生,因此提出假设:在 DO 比较高条件下的 AGS 短程硝化的体系中,粒径不同的 AGS 具有不同的作用,粒径小的颗粒污泥主要起到全程硝化的作用,体系中NH4+-N的去除主要是小粒径的颗粒污泥起作用,而其产生的NO3--N 由大颗粒污泥的反硝化作用去除,同时大颗粒污泥在去除 NH4+-N 的同时产生 NO2--N,体系短程硝化的实现主要是达到一定粒径的颗粒污泥在起主要作用.随着粒径的增大,系统为达到完全的NH4+-N 去除和生成 NO2--N,以及后续的反硝化,体系中 DO 的浓度可以更高.这样来说,颗粒粒径的增大可以使系统的运行条件更加宽松,运行更加简单.
经过测定,粒径大于 3.0mm 的颗粒占整个反应器中颗粒总数的 25.33%,粒径为 2.0~3.0mm 的颗粒占 62.47%,粒径小于 2.0mm 的颗粒占 12.2%.可以看到粒径大于 2.0mm 的颗粒污泥占反应器中颗粒污泥总数的比例较大,因此反应器体现出较强的短程硝化性能.如果本反应器中粒径小于 2.0mm 的颗粒污泥占的比例较大,则反应器短程硝化的性能较弱.
本实验研究 AGS 的粒径尺寸最大为 4.0mm 左右,在本实验研究的粒径范围内(0~4.0mm),粒径的增大对 AGS 的短程硝化活性的作用表现为两个方面,包括促进作用和抑制作用.促进作用:小颗粒污泥具有更好的传质效率和更大的比表面积,可以展现更好的生物活性.因此颗粒中的微环境与外界环境差别不大,基质充足,不能有效抑制 NOB 的生长,随着颗粒的增大,受传质作用的影响,颗粒污泥内部可以提供低 DO 的环境,可以抑制 NOB 的生长,所以粒径的增大将对 AGS 的短程硝化活性产生促进作用.抑制作用:随着粒径的增大,颗粒内部反硝化等产生的气体会溢出颗粒污泥,这些气体的溢出会使AGS 内部布满了孔道,这有利于基质进入颗粒污泥内部,破坏颗粒污泥已经形成的微环境,在一定程度上缓解传质作用的影响,从而抑制短程硝化.
2.3.3 氧气的传质
在 R1、R2 和 R3 中随机选取一颗 AGS,通过显微镜测得它们的半径依次为 533µm,1146µm 和 1524µm.将 AGS 固定在测量槽中,利用微电极技术测量颗粒污泥内部氧气传质的浓度梯度.测量槽中加入人工配水,水质为 NH4+-N 和 NO2--N 浓度为 20mg/L,NO3--N 浓度为 10mg/L,未添加碳源.通过水浴控制槽中的水温在 15℃.在测量槽水中进行曝气,直到水中DO 为6mg/L 左右停止曝气.颗粒在测量槽中与水接触 1h 后认为反应稳定,微电极的尖端在水中从 AGS 的正上方直接插入 AGS 进行测量,认
为 AGS 为规则的球形,设定颗粒污泥上部与水的水平接触面所在位置为零点,实验结果见图 6.
可以看到氧气在 AGS 内部的浓度梯度明显,3个不同粒径的 AGS 中氧气的传质过程相似.R1 中取出的样品因为粒径较小,在颗粒的中心处 DO 的浓度还可以达到 1.32mg/L,而 R2 与 R3 中 DO 的浓度可以达到 0mg/L,为反硝化细菌提供了缺氧环境.有研究表明,AOB 和 NOB 的氧饱和系数分别为0.3,1.1mg/L,它们在有限氧的条件下会对氧气进行争夺.因此,大多数的研究为了达到短程硝化都通过控制低 DO 的条件,使 AOB 可以生长,抑制 NOB生长.R1 中小粒径的颗粒内部 DO 不足以抑制 NOB的生长,所以出水 NO3--N 的浓度较高.而 R2 和 R3中取出的颗粒污泥粒径较大,其内部较低的 DO 可以有效的抑制 NOB 的生长及活性,可以实现NO2--N 的积累.已经有研究指出,生物膜可以显著的影响氧气传质.Anthonisen 等[17]得出当外界 DO 浓度为 3.3 和 6.8mg/L 时,在生物膜 30µm 处 DO 降低为 0和 0.06mg/L.Rathnayake 等指出外界 DO 浓度为2mg/L 时,在生物膜 100µm 处 DO 降低为 0mg/L.对于好氧颗粒污泥来说,当外界 DO 浓度为 5.5mg/L 时DO 的传质深度在 100µm[19].与其不同,本实验中外界 DO 浓度为 6mg/L 时,DO 在 600~700µm 的深度才降为 0.通过对比,Kishida 等[19]的反应器设置有搅拌装置,而本实验中并未设置,这可能导致本实验中形成的颗粒污泥结构不够密实,如图 2d 也可以看出好氧颗粒污泥内部空洞较多,这将有利于氧气传质到更深的地方.其次,本实验在低温条件下进行,温度会影响硝化细菌的活性,低温会导致颗粒污泥外部硝化细菌活性降低,使得外层好氧区域扩大,从而使颗粒污泥内部氧的扩散深度增加.
运行第 100d 时,提高 DO 为 8mg/L 左右,AGS内部氧气传质的深度增加,颗粒中原来分布的 NOB得到更多的 DO 从而恢复活性,短程硝化被破坏.但是,依照所测得的结果(图 6)推测,即使外界 DO 为8mg/L,粒径在 2mm 以上的 AGS 中也存在着缺氧区域,依旧可以提供反硝化菌、AOB 和 NOB 的生存环境.Bian 等通过比值控制实现了短程硝化,说明短程硝化所需要的氧传质条件不仅仅与 DO 有关,而且还与氨氮的浓度有关,因此推断即使在 DO 为8mg/L 的条件下,通过提高氨氮的浓度,经过长时间的调控运行,该系统也可以实现短程硝化.
颗粒粒径的增大,相同体积的颗粒污泥比表面积变小,相对的颗粒单位表面积的氨氮负荷提高,这使得氧的传质深度变小,而 AOB 的氧亲和力要高于NOB,这将导致颗粒中好氧区变小,缺氧区变大.在好氧颗粒污泥系统中,不同的细菌之间在争夺着颗粒内部的空间和基质,AOB 和 NOB 争夺氧气,而 AOB具有更高的氧亲和力,而反硝化细菌受到氧气的抑制,需要严格的缺氧环境.这些微生物分布在颗粒中相互影响,并且直接影响着反应器的性能.AGS 系统实现亚硝化必须使得AOB的活性高于NOB.系统达到稳定后 AOB 将在氨氮和氧气都比较充足的颗粒污泥的外层.NOB 如果没有被淘洗干净将会在 AOB的下一层,这里会有一定的氧气足够 NOB 将NO2--N 氧化成 NO3--N.反硝化细菌则生长在颗粒污泥中的缺氧的部分,这里 NO2--N 和 NO3--N 以及COD 可以传质进来,但仍然靠近 AOB 所在的层.
单从氧气的传质角度来看,颗粒污泥的粒径越大越有利于短程硝化实现.但有研究表明,颗粒污泥粒径越大越不稳定[21].Toh 等[22]研究发现,当颗粒粒径>4mm 时,粒径增大反而会导致其沉降性能变差,在浮力及外部剪切力作用下,最终会导致颗粒污泥解体,从而影响污染物去除效果和固液分离性能.实际中在用好氧颗粒污泥实现短程硝化处理污水时,可以将颗粒污泥的粒径控制在合理的范围,避免粒径较大而带来的不稳定运行情况.李定昌等研究表明,在 AGS 培养的工程实践中,可将 AGS 粒径控制在 1.6~2.0mm 范围内,维持较高的 PN/PS 值,以利于颗粒污泥的形成和稳定维持.
3 结论
3.1 15℃下,在 SBR 反应器中培养好氧颗粒污泥,培养过程中会出现丝状菌大量增殖的现象,通过逐渐缩短沉淀时间,性能良好的好氧颗粒污泥可以形成.
3.2 低温条件下的 AGS 培养,随着 AGS 粒径增大,开始出现 NO2--N 积累. 培养成熟的 AGS 具良好的污染物去除性能,出水氨氮几乎为零,出水 NO3--N在 5mg/L 左右,稳定时 NAR 可以达到 90%以上.
3.3 AGS 随着粒径的增大,其对有机物的去除效果整体差别不大,但前期消耗 COD 的速率会降低. 粒径对短程硝化的影响体现在促进作用和抑制作用两个方面.AGS 内部氧气传质明显,当水中 DO 为6~7mg/L 时,粒径为 2mm 的颗粒污泥已经可以提供实现短程硝化适宜的微环境.
